《蜘蛛侠：崭新之日》的主演阵容由汤姆·赫兰德、赞达亚、马克·鲁法洛领衔，并加入了乔·博恩瑟、萨迪·辛克等新面孔，共同构建了这一部“被世界遗忘”后的蜘蛛侠故事。
一、核心回归主演：那些熟悉的面孔
汤姆·赫兰德 (Tom Holland)：第七次饰演彼得·帕克/蜘蛛侠。本片中他被世界遗忘四年，独居纽约，以全职英雄身份守护城市，却面临基因失控的危机。
赞达亚 (Zendaya)：回归饰演米歇尔·琼斯-沃森（MJ），彼得曾经的恋人。因“遗忘咒”不再记得彼得，在本片中已有了新男友。
雅各布·巴塔隆 (Jacob Batalon)：回归饰演内德·利兹，彼得最好的朋友，同样忘记了与彼得的一切。
马克·鲁法洛 (Mark Ruffalo)：回归饰演布鲁斯·班纳/绿巨人。班纳依靠抑制剂维持人形但效果濒临极限，在本片中将成为彼得求助的对象，形成“失控变身”的双线映照。
二、新加盟的角色：为宇宙注入新鲜血液
乔·博恩瑟 (Jon Bernthal)：首次在蜘蛛侠电影中登场，饰演弗兰克·卡斯特/惩罚者。他的出现为影片增添了更黑暗、更暴烈的街头英雄色彩。
萨迪·辛克 (Sadie Sink)：加盟饰演琴·格雷（传闻）。这位《怪奇物语》女演员的角色尚未正式官宣，但据推测可能饰演凤凰女，为X战警与MCU的联动埋下伏笔。
迈克尔·曼多 (Michael Mando)：回归饰演麦克·加根/蝎子。延续《英雄归来》片尾彩蛋的设定，此次正式登场成为蜘蛛侠的强劲对手。
马文·琼斯三世 (Mahershala Ali)：首次在MCU中以真人形式饰演“墓碑”，该角色是漫画中的经典黑帮反派。
三、其他重要演员与幕后团队
其他参演者：包括饰演梅·帕克的玛丽莎·托梅、饰演叶莲娜·贝洛娃的弗洛伦丝·皮尤（传闻客串），以及饰演警局队长的莉莎·科伦-扎亚斯等。
幕后主创：本片由德斯汀·克里顿（《尚气与十环传奇》导演）执导，编剧团队由克里斯·麦克纳和埃里克·萨默斯组成，成龙团队的“成家班”首次为蜘蛛侠系列担任动作指导，带来了更具东方韵味和硬核实感的打斗风格。