肾阳虚模型
1.症状
肾阳虚主要由禀赋不足，年老体虚，耗损过度，补养不足及气机阻滞所致。临 床多见面色苍白、形寒肢冷，腰膝酸痛、下肢软弱无力，小便不利或小便频数， 少腹拘急，男子阳痿早泄，女子宫寒不孕，舌淡苔白，脉沉细等。肾阳虚证与衰老、诸多疾病关系密切，涉及全身脏腑组织。按照中医异病同证的理论，许多慢性病都可能出现肾阳虚证。
2.肾阳虚模型形成的机制
自1963年邝安垫教授创立氢化可的松阳虚模型以来，涌现出多种建立肾虚动物模型方法：如以大剂量的外源性糖皮质激素使实验动物出现“耗竭”现象，出现一系列“虚弱”症状，类似中医的“阳虚”，所用的动物主要为大鼠和小鼠。又如氨基导眠能法、腺嘌呤法、甲状腺切除法、利血平法等肾阳虚的造模方法。 一般认为模型短期(7天)为肾阴虚，10天后属肾阳虚。这些模型的建立为肾阳虚证本质的研究奠定了基础。
3.肾阳虚与下丘脑-垂体-靶腺轴的关系
肾阳虚证的本质一直是中医的研究重点。60年代，上海第一医学院发现肾阳虚证患者24h尿17-羟皮质类固醇含量普遍低于正常值。沈自尹提出了肾阳虚与现代医学的神经内分泌免疫系统(NETS)有关，肾阳虚证时存在着下丘脑-垂体-靶腺(肾上腺皮质、甲状腺、性腺、胸腺)轴不同环节、不同程度的功能紊乱，且主要的发病环节在于下丘脑(或更高级)的调节功能紊乱。 现代医学认为，神经内分泌系统与免疫系统之间形成一个网络，并有许多研究 提示下丘脑是该网络枢纽，肾虚是由于介导网络平衡功能的相关物质基因表达出现异常，使神经内分泌免疫网络的功能失衡。肾阳虚证与神经内分泌功能关系的研究较多，肾阳虚公认的病理基础是下丘脑一垂体-靶腺，肾上腺、甲状腺、 性腺)轴的降低，反映这几个轴功能下降的指标是肾阳虚证较为特异的指标。甲状腺功能的降低在肾阳虚病机理学中占有重要位置，研究发现肾阳虚大鼠T3、T4 值明显低于正常，金匮肾气丸能显著提高上述指标。 大量研究表明人到老年往往出现生理性肾虚，此时下丘脑-垂体-性腺轴发生明显改变，随年龄增长，男性血浆T水平呈下降趋势，而E2水平却明显升高，女性反之。血中垂体黄体生成激素(U_I)和FSH水平代偿性升高。下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)功能异常降低则与肾阳虚证相关，研究发现肾阳虚大鼠下丘脑-性腺轴caM的mRNA明显升高，淫羊藿总黄酮能显著降低下丘脑-睾丸组织CaM 的mRNA水平，进一步提示下丘脑-性腺轴异常是肾虚证形成的重要机制之一。 可的松致肾阳虚大鼠垂体促性腺激素分泌细胞内质网、高尔基体严重扩张，线粒体空化，细胞核固缩。睾丸曲细精管生精上皮细胞血睾屏障扩张，细胞中出现许多大小不等的空泡。补肾中药能够改善垂体超微结构的损伤，但却不能改变睾九超微结构的损伤。 肾阳虚的许多表现均与肾上腺皮质激素，主要是皮质醇分泌不足显著相关。张新民等发现肾虚患者下丘脑-垂体一肾上腺皮质轴有不同程度、不同环节的功能紊乱。研究表明可的松致肾阳虚大鼠下丘脑视交叉上核和肾上腺组织中原癌基因阳性细胞数显著升高。垂体促肾上腺皮质激素分泌细胞内质网扩张，线粒体空化，肾上腺皮球状带和网状带萎缩，束状带细胞内脂滴变小，分布异常。 同时下丘脑、血淋巴细胞胞内Ca2+(Ca“)和血清钙的显著升高，导致ca2+信号异 PKll在肾阳虚模型下丘脑、肾上腺组 CaM信号系统传导通路下游的关键酶CaM织中显著增强。CaMPKII被Ca2+-CaM激活后可以产生磷酸化反应，引起酶级联反应及c．Fos表达改变，从而导致机体反应异常，出现肾阳虚的症状。
4.肾阳虚证的现代医学证据
在肾阳虚证光镜形态研究、水盐调节功能研究、自由基研究等方面也有一定的进展。90年代中期，随着现代科学技术的发展，肾阳虚证的研究深入到神经生物学、亚细胞学、细胞分子免疫学等领域。
5.肾阳虚证的神经生物学研究
高博等提出NOS／cGMP系统可能在肾阳虚证中发生变化，抑制了下丘脑的功能。实验表明，肾阳虚下丘脑组织N0s(以nNOS为主)活性升高，血清和下丘脑组织NO水平也明显升高，但下丘脑升高幅度明显高于血清，高博等认为N0在下丘脑局部的显著升高可能从侧面证实了下丘脑在肾阳虚证发病机制中的重要作用。有研究发现，肾阳虚证模型大鼠下丘脑组织胞膜和胞液中蛋白激酶A(PKA) 和蛋白激酶C(PKC)的活性降低。研究还发现补肾药(如淫羊藿等)能增加下丘脑细 胞中PKA和PKC水平。 郑里翔等观察肾阳虚对大脑单胺类递质和胆碱酯酶的影响，发现。肾阳虚证与正常组比较有明显下降，乙酰胆碱酯酶(Ach．E)则明显上升。认为DA、NE的变化打破了大鼠的体温调节平衡，导致大鼠出现形寒肢冷等症状。NE的降低可能是导致肾阳虚大鼠嗜睡的原因，而Ach．E活性的升高，使乙酰胆碱(Ach)水解量增加， 最终使肾阳虚大鼠记忆减弱。
6.肾阳虚证的亚细胞学研究
近年来，随着整体研究水平的提高，更多的学者将研究目光转移到了电镜水平形态学研究。傅晓晴等发现肾阳虚动物的肾小球毛细血管基底膜轻度增厚，管腔狭窄，内皮细胞足突部分融合。肾小管上皮细胞水肿，线粒体肿胀，嵴破坏断裂，并伴有内质网扩展及脂滴少见。有的上皮细胞内含针状或长方形结晶。溶酶体增多，并与退变的细胞器融合，形成次级溶酶体。宋春风等ll”J观察到下丘脑正中隆起室管膜细胞界限不清，微绒毛分布改变，微绒毛顶端膨大呈球形，许多细胞部位出现孔洞，几乎未见分泌样颗粒结构。并认为是细胞分泌功能下降，细胞坏死的表现。雷娓娓等发现肾阳虚证模型SD大鼠脾脏多数淋巴细胞溶解消失， 残存的淋巴细胞稀少，边界不清，核内异染色质变少，核周间隙边宽，细胞质中细胞器明显减少。在胸腺中，淋巴细胞的排列松散，形状不规则，界限不清，细胞核固缩或变性，可见巨噬细胞。
7.肾阳虚证的细胞分子免疫学研究
目前，对肾阳虚的现代免疫学研究主要集中在肾阳虚的细胞免疫、红细胞免疫等方面。李庆阳等对老年肾虚与T细胞亚群关系进行了研究，发现老年肾阳虚上升。他们认为T细胞网络失去平衡，使细胞免疫功能失调，导致了肾阳虚的发生。刘永琦等认为肾阳虚与肾阴虚在细胞免疫上的区别是肾阳虚证辅助性T细胞降低，肾阴虚则为抑制性T细胞低下。红细胞不但具有运输氧气的作用，还是一种免疫物质。人体中90％以上的免疫复合物都是靠红细胞运输至肝脾中被清除。 李瑞荃等实验发现肾阳虚性模型组大鼠红细胞C3b受体花环率显著下降，红细胞CRl受体活性受到抑制，红细胞膜上黏附的免疫复合物花环率下降，表明肾阳虚的红细胞免疫能力下降。董慧等对19例肾阳虚证患者红细胞的LP0、SOD进行检测。研究表明，肾阳虚证患者红细胞的LPO明显升高，SOD活性明显减低， 提示红细胞脂质过氧化反应增强，而清除氧自由基能力下降，抗氧化能力降低。 红细胞的结构损害，其免疫能力也随之下降。各种ATP酶通过对离子的主动运输来维持细胞膜内外的离子平衡，且与人体的寒热有密切的关系。Na+、K+．ATP酶、Ca2+ M．ATP酶等都有活性与健康人有显著的升高。ATP酶与肾阳虚的关系还有待进一步研究。
8.肾阳虚其他方面的研究
徐晓阳在实验中发现0.5％腺嘌呤喂饲造成的肾阳虚大鼠肾脏蛋白激酶活性明显降低。邓银泉报告慢性肾炎患者血浆纤维结合蛋白值显著低于健康人，伴有湿热瘀滞者明显低于无湿热瘀滞者，且与血尿素氮呈负相关，但肺肾气虚、气阴两虚、脾肾阳虚、肝肾阴虚各症型无明显差异。朱方石等对89例6种症型肝硬化患者血清白蛋白frP)、白蛋白(A】m)检测及白球蛋白比例(A／G)分析， 结果显示，血清TP、ALB及A／G较正常人下降，其中脾肾阳虚和肝肾阴虚型显著 低于正常人。李文静和陈如泉观察到甲状腺机能减退症大鼠血清S1L．-2R(活化 淋巴细胞膜白细胞介素2受体的a链成分)较正常大鼠明显降低。 此外，马威等用非线性映射方法对肾阳虚的微量元素改变进行研究，发现肾阳虚模型铜、铁、锌等元素有明显下降。王大健等认为骨密度下降是肾阳虚的一种特征性表现，可以作为肾虚辨证的客观评价指标和肾虚证治疗效果的参考依据。一些学者的研究表明，高密度脂蛋白等的代谢异常也可以作为肾阳虚的诊断依据。
综上所述，肾阳虚证的实质研究是一个漫长的过程。但随着研究的进一步深入， 医学界将会对肾阳虚证有一个新的认识，为临床中西医结合治疗肾阳虚证疾病提供更多的依据。
9.雄激素
激素是由内分泌腺和内分泌细胞所分泌一种具有高效能生物活性物质的总称。 这类具有生物活性的物质可以经由血液的运输，对机体其它组织和细胞发挥调节作用。激素一般具有特异性、高效能性、信息传递性的特点。各激素具有不同的作用、分泌来源不同，彼此之间相互作用相互影响，内分泌腺体和身体其它腺体最大的差别，是这些腺体不一定彼此相接，但是它们的功能是一致的。一个腺体可能分泌多种激素，但一种细胞通常只能分泌一种激素，即某个腺体之所以能分泌多种激素，是由于它可能有多种分泌细胞，只有极少数细胞可以分泌一种以上 的激素。根据化学结构不同，激素大体可以分为胺类、多肽以及蛋白质、类固醇和脂肪酸类四种。 类固醇激素是胆固醇经由酶代谢而来。由于特有的脂溶性特性，类固醇激素合成之后，可以直接释放到细胞外。胆固醇是所有类固醇激素的前身，是一个含有四个环状结构的27碳化合物。虽然产生类固醇激素的腺体可以合成部分胆固醇， 但是其主要来源是由血浆的脂蛋白提供，这些脂蛋白在肝脏内合成后，进入血液。 由胆固醇合成类固醇是一个复杂的过程，需要许多酶参与。因此，类固醇激素的种类会随着细胞种类以及其含有的酶的不同而有所改变。体内存在的类固醇激素大体可分成糖皮质激素、盐皮质激素、孕激素、雄激素、雌激素、胆钙化醇这几种。 雄激素为一类十九个碳的类固醇化合物，主要由睾丸间质细胞产生。睾酮是由睾丸间质细胞分泌的真正雄激素，其他一些雄激素则可能是睾酮生成时的中间产物或睾酮的代谢产物。在女性体内，肾上腺皮质也可生成雄激素，但其分泌量与睾丸相比则是微不足道的。但女性体内的雄激素对于维持女性的性欲起着非常重要的作用。早在11世纪，中国北宋的沈括就已成功地从大量人尿中提取出了雄激素，并应用于医疗实践。
雄激素的主要生理功能是：
(1)通过垂体-下丘脑系统调节促性腺激素的分泌；
(2) 促进并维持曲精管的精子产生；
(3)在胚胎性分化期形成男性生殖器官；
(4)在青春期刺激男性副性征和附属器官的发育、成熟，并维持其成熟状态与功能。 雄激素对代谢也有作用，主要表现在对蛋白质，糖类，脂肪以及骨代谢的调节。 雄激素促进蛋白质的合成，特别是肌肉和生殖器官的蛋白质合成，同时还能刺激细胞的生成。当睾丸功能低下时，如无睾症和隐睾症等，可用雄激素补充治疗。Holmang等研究发现，切除卵巢的4周龄sD大鼠每2周肌注庚酸睾酮2 12周后肌肉对3H．葡萄糖的摄取减少，肌纤维的类型发生改变，对胰岛素敏感的1型肌纤维减少，对胰岛素不敏感的2型肌纤维增多，14C-葡萄糖掺入肌肉减少，而掺入肝脏无变化。提示雄激素通过降低肌肉对胰岛素的敏感性，引起胰岛素抵抗， 最终导致糖尿病等一系列综合症。同时也有证据表明高胰岛素血症可引起雄激素水平的增耐。
以上结果表明雄激素和胰岛素两者之间存在着某种相互影响相互调节的作用机制。雄激素对脂质代谢影响的研究结果不尽一致，一些实验证明雄激素通过脂肪组织中雄激素受体的表达产生调节，促进脂肪分解过程，因而肥胖的睾丸功能减退患者在睾酮治疗后会因脂肪分解而减轻体重。但是也有一些研究显示，在雄激素治疗后体脂量没有明显改变。男子骨质疏松和发生骨折的危险因素被认为是雄激素缺乏。雄激素影响骨代谢的机制未明，一些研究发现成骨细胞和骨髓基质细胞含有雄激素受体(AR)，体外培养雄激素能刺激成骨细胞的分裂增殖。另一方面，雄激素抑制破骨细胞的活动。因此，雄激素可用来防治骨质疏松，但不能作为骨质疏松常规用药。此外，雄激素对免疫系统也有重要的调节作用。由于雄激素对代谢具有多方面作用，所以雄激素制剂除用于雄激素不足的治疗外，临床上常用雄激素类药物治疗慢性消耗性疾 病及再生障碍性贫血。
10.雄激素受体
雄激素受体是一种配体依赖性的反式转录调节蛋白，属于核受体超家族成员， 主要存在于靶细胞的核内。未与配体结合的AR与热休克蛋白(hsp)结合，而AR与配体结合后，则发生构象变化，与hsp解离，使All与DNA亲和力增高(受体的活化)，活化的AR以二聚体形式与靶细胞核中特定的DNA序列雄激素反应元件 (ARE)结合，并与其它转录因子相互作用，从而调节靶基因的表达，产生生物效应。