甘草总黄酮提取部位抗小鼠抑郁活性可能与其增强中枢5羟色胺能神经功能有关
摘要：目的 探讨甘草总黄酮提取部位（LF）的抗抑郁作用及可能的作用机制。
方法 Km 小鼠分别每 ｐｏ给予LF5，30 和180 gkg h进行强迫游泳实验（FST），记录4内不动时间；另取Km小鼠，按照FST 的实验分组处理，于第1 内不动时间。ICR小鼠分别每天 ｐｏ给予 LF 50，150 400gkg ，连续7d，进行利血平诱发症状拮抗实验（ART），于末次给药后1h采用记录小鼠运动不能、上睑下垂和监测肛温；另取Km 小鼠，分别每天 ｐｏ给予LF 50，150 和400gkg 后sc阈致死剂量的育亨宾，观察24小鼠存活情况；取Km小鼠，分别每天 ｐｏ给予 LF 50，150 400gkg 内的甩头次数，并检测皮质、海马和丘脑中单胺氧化酶（mAO）活性。结果 FST 和TST 实验结果显示，与正常对照组比较，LF 够减少小鼠游泳和悬尾的不动时间，且与氟西汀有相似的时-效特点。ART实验结果显示，LF后引起的小鼠体温降低。LF 对育亨宾阈致死剂量引起的小鼠死亡没有协同增加作用；LF150 和400 gkg 均能明显协同增加注射5-羟色氨酸后甩头次数，小鼠皮质、海马和丘脑中mAO 活性与正常对照无差异。
结论 LF 在急性绝望小鼠模型上具有抗抑郁样作用，其作用机制可能与其直接增强脑内5-羟色胺能神经功能有关。
甘草为豆科甘草属多种植物的根和根茎。甘草提取物具有良好的抗实验动物抑郁 模型的活性，其涉及的活性成分包括甘草素、异甘草素、光甘草定、甘草苷和异甘草苷等，而所涉及的可能作用机制包括对中枢单胺氧化酶（mAO）的抑 5-HT）再摄取转运体蛋白5-HT转运蛋白（SERT）及靶位突触后膜5-HT 1A 受体的 阻断作用 。由于活性成分多为黄酮，所以增强中枢的抗氧化能力亦可能为甘草抗抑郁活性的重要机。而笔者前期实验研究表明，从宁夏地区栽培甘草中获得的甘草总黄酮（ LF）提取部位具有抗大鼠慢性应激抑郁行为的作用，且可能机制涉及对海马神经再生能力的保护 作用本研究拟采用小鼠强迫游泳实验（FST）和悬尾实验（TST），评价LF 在急性绝望模型上的抗抑郁样作用；采用 5-羟色氨酸（5-HTP）诱导小鼠甩头实验（ HTT）、育亨宾毒性增强实验（YTPT）、利血平诱发症状拮抗实 验（ART）和脑内 mAO 活性检测实验，以期进一步研究分析LF 的抗抑郁作用及相关机制。
讨论本研究结果发现，LF在亚急性用药7d即对FST和TST中的不动时间产生影响，且随用药时间的延长效果则更为明显，说明 LF不仅具有对抗慢性应激抑郁行为的作用 ，在急性绝望模型上同样具有抗抑郁样作用。 现代药理学研究表明，目前临床使用的抗抑郁药最终的疗效多数与增强中枢5-HT能神经功能有。利血平作为传统的单胺类神经递质的耗竭剂，主要通过抑制囊泡的再摄取功能使单胺神经递质滞留在囊泡外而被 mAO降解，从而使递质耗竭、神经功能下降，继而引起行为和生理反应而。作为经典的抗抑郁动物实验模型。通过对利血平拮抗实验所表现出的动物行为分析与中枢特定神经功能变化的相关性分析得出，能够拮抗利血平引起的上眼睑下垂症状的药物，可能与其增强中枢肾上 腺素能神经功能或 5-HT能神经功能机制有关；能够拮抗利血平引起的体温下降的药物，可能与其直接或间接激动中枢β-肾上腺素受体有关；而药物能够拮抗利血平引起的运动不能症状，可能与其直接 或间接增强中枢多巴胺能神经功能机制有关。本研究发现，给予LFd，各剂量组对利血平诱发的眼脸下垂及运动不能症状有较好的改善作用，而对体温下降症状没有作用。所以，推测LF可能有中枢 5-HT能神经功能或多巴胺能神经功能增强作用，而无中枢β-肾上腺素受体的激动效应。 本研究进一步发现，同样给予7的LF不能够协同增强阈剂量水平的育亨宾产生的毒性反应。而研究表明，育亨宾可选择性地抑制中枢去甲肾上腺素能神经突触前膜上的α 受体，抑制去甲肾上腺素的再摄取，进而增强中枢去甲肾上腺素能神经的功能。当将可能增强中枢去甲肾上腺素神经功能的药物与阈致死剂量的育亨宾同时应用，就可以通过上述机制产生协同作用，增强毒性反应。该模型主要用于研究可能通过促进中枢去甲肾上腺素能神经功能发挥治疗作用的药物作用机制的分析，推测LF的抗抑郁作用可能与增强中枢去甲肾上腺素能神经功能无关。 5-HTP诱导小鼠甩头实验模型最早由Corne在1963年建立标准。如果预先给予可能增强 中枢5-HT能或去甲肾上腺素能神经功能药物，如5-HT再摄取抑制剂类抗抑郁药或 mAO抑制剂，可使中枢相应递质水平蓄积增多；若再给予 mAO制剂帕吉林进一步抑制mAO 的活性后，再行给予 5-HTP进一步增加中枢内 5-HT水平，实验动物出 现特殊的甩头样行为症状。本研究结果显示，给予的LF能够明显协同增加5-HTP引起的 甩头次数，并且体现了良好的剂量依赖关系。同时本研究通过检测小鼠脑内不同脑区 mAO活性发现，与他人的研究结果有所不同，LF有明显的抑制作用，原因可能与他人采用离体实验方法有关。
综上所述，宁夏地区甘草中提取分离获得的LF在急性绝望模型上具有抗抑郁样作用，其机制可能涉及直接增强中枢5-HT神经功能。