查士丁尼一世（Justinian I，拉丁语：Flavius Petrus Sabbatius Justinianus，482 年 – 565 年）是拜占庭帝国最具雄心的皇帝之一，在位 38 年（527–565），被后世誉为“最后一位罗马皇帝”和“第一位拜占庭皇帝”。他的统治既延续了古典罗马的传统，又开创了中世纪拜占庭的范式。

他出生于伊利里亚的农民家庭，被舅父查士丁收为养子。518 年随查士丁入京，先任宫廷侍卫，再任凯撒。527 年与狄奥多拉皇后共治，依靠皇后出身低微却极具政治手腕的辅佐，稳固了帝位。

他的政绩不凡，对外征服方面，发动再征服战争夺回北非、意大利与地中海大片疆域。行政方面，用 38 年时间将罗马法精炼为《查士丁尼法典》。建造圣索菲亚大教堂，穹顶直径 31 米，屹立 1400 年，成为拜占庭建筑巅峰。关闭雅典学院 ，终结古典异教教育。颁布《查士丁尼法典》中的反异教条款，强制推行基督教。

晚年瘟疫（541–549）与战争耗空国库，再征服地区逐渐失守。565 年病逝，享年 83 岁。其法典、建筑与帝国版图构想，奠定了拜占庭帝国此后 900 年的政治、法律与文化框架。