科研路上的小伙伴们,还在为如何验证RNA与蛋白质的相互作用(RBP)而发愁吗?快来看看这个研究利器——RNA Pulldown!
💡 原理: 它利用生物素(Biotin)链霉亲和素磁珠的高亲和力,精准富集并鉴定与之结合的蛋白质复合物
。
🛠 实验三步走:
探针制备:体外转录获取标记生物素的RNA,并诱导其形成二级结构。
孵育捕获:探针与细胞裂解液孵育形成复合物,再用磁珠“拉”下来。
结果鉴定:洗脱后通过Western Blot验证已知蛋白,或用质谱(MS)大规模筛选未知蛋白。
🌟 应用场景: 无论是研究lncRNA、circRNA还是mRNA,它都能帮你揭秘那些调控基因表达的“幕后推手”。
相比“已知蛋白找RNA”的RIP实验,RNA Pull-down则是“已知RNA找蛋白”的逆向思维,两者互补更是高分文章的标配哦!
发布于 广东
