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26-05-15 01:03 微博认证:湖南农业大学

DNA指纹图谱报告告诉您哪些信息

亲本 DNA 指纹检测是作物品种真实性鉴定、遗传纯度评估和亲本溯源的重要手段。通过分子标记技术对亲本材料进行检测,可形成亲本材料的专属遗传指纹,为品种选育、亲本及组合质量控制、知识产权保护提供科学依据。
一、DNA指纹报告的核心数据及专业术语解释
一份完整的 DNA 指纹检测报告,一般会输出 DNA 指纹数据的缺失率、杂合率等统计指标,并给出测试样品的DNA指纹数据,SSR位点的基因型数据采集通常采数字/数字的统一规范,小数字在前,大数字在后。
1.纯合基因型
如果基因型为 “两个相同数字”(如 350/350),表示该位点两个等位基因基因型相同,是自交系亲本典型特征,体现自交系的遗传稳定性。
2.杂合基因型
如果基因型为 “两个不同数字”(如 278/284),表示该位点的两个等位基因基因型不同,反映亲本在该位点存在变异或少量遗传混杂,需区分杂合原因进行位点再分析。
3.空等位基因型
如果基因型标注为 “--/--”,代表空等位。空等位一般是由于亲本自身的遗传变异所导致,往往是因标记位点引物结合区发生突变,导致无法扩增目标片段,并非实验误差,是自交系正常的遗传特征。由于玉米基因组的复杂特征,空等位在各类玉米材料中均有可能出现,相比杂交种,自交系中空等位出现的频率更高。
4.数据缺失
如果基因型标注为 “/”,代表数据缺失。数据缺失一般由于原始样品严重降解或变质(比如样品霉变严重)、 DNA 质量差、模板浓度不足、PCR 扩增异常等实验操作因素导致,属于实验层面无效数据,反映样品质量或检测操作存在瑕疵。需要向各位专家及部门说明的是,由于缺失和空等位在比对时视为无效位点,因此辽宁东亚检测实验室早期出具的检测结果中,未区分空等位和缺失,统一用“/”代表无效位点,本实验室所有缺失位点均进行补点验证,无效位点中的缺失位点占比非常小。
二、亲本杂合率偏高的原因及杂合位点处理
理想的亲本为纯系,遗传背景高度纯合,理论杂合率接近 0%。但在实际检测中,受自然变异、轻微串粉、样品轻微污染等因素影响,杂合率一般维持在极低水平。若亲本杂合率超过一定阈值,排除上述因素后,多由亲本自身遗传尚未稳定所致。
在出具DNA指纹数据报告时,需关注杂合位点是否样品微量污染所致,避免因小失大,影响品种参试。微量污染多发生在样品准备与实验操作环节,样品准备环节如取样时混入少量杂株或个别杂粒,实验操作环节如试剂、操作环境造成的外源 DNA 污染。这类因素造成的杂合位点,均不代表材料自身真实的遗传特征,建议检测机构通过设置对照、对可疑位点进行单株个体复检、比对整体指纹特征及同批次样品综合分析等方式,排除污染造成的假性杂合。只有排除污染影响后的杂合率,才能真实反映材料自身存在的遗传变异。建议送样人在取样或样品准备时选择具有典型特征的样品或种子,避免或防止取杂取混。
三、DNA指纹数据报告的其他用途
在 DNA 指纹数据报告中,依据提供的指纹数据,能够初步分析材料间的遗传关系与身份一致性。例如,对两份自交系进行比对时,可查看各位点基因型是否一致,以此判断是否为同一材料、是否存在混淆或错用;将杂交种与其父母本指纹比对时,可观察杂交种的杂合位点是否与父母本的纯合位点是否存在互补特征,以此验证亲本组合的真实性,排查材料误用、错用或混用等问题。
需要注意的是,不建议将不同检测机构出具的 DNA 指纹数据报告直接进行比对分析。原因在于各机构在某些位点的判读标准可能存在细微的差异,会导致同一位点的条带大小、峰图信号、分型结果不完全一致,容易造成误判(尤其是其他作物的DNA指纹数据),此外,不同机构的数据质控体系、实验流程与异常位点处理方式也不尽相同,跨机构比对会降低结果可靠性,影响判断的准确性。 #科学科普[超话]# #科学科普[超话]# http://t.cn/RyhHfcs

发布于 云南