高良姜素治疗白癜风的新希望
近日，新疆维吾尔自治区维吾尔医医院与安徽医科大学团队合作在《British Journal of Pharmacology》发表的最新研究，通过体内外实验系统揭示了高良姜素通过靶向巨噬细胞中ANXA2的降解，调节免疫稳态和黑色素细胞功能，为白癜风的防治提供了全新的科学依据和治疗策略。
白癜风作为一种常见的色素脱失性皮肤病，以黑色素细胞选择性丢失为核心病理特征，临床表现为皮肤出现无鳞屑、边界清晰的乳白色斑片，全球患病率约为2%，且发病率呈逐渐上升趋势。该病虽不具传染性和致命性，但严重影响患者外观，易引发心理压力、自卑及社交隔离等问题，显著降低生活质量。其发病机制复杂，涉及遗传易感性、免疫失调、氧化应激等多种因素，其中免疫微环境紊乱与巨噬细胞介导的炎症反应被认为是推动疾病进展的关键环节。巨噬细胞通过促进黑色素细胞凋亡参与白癜风发病，而膜联蛋白A2（ANXA2）作为钙介导的磷脂结合蛋白家族成员，在调控巨噬细胞炎症反应、增殖及炎症因子分泌中发挥重要作用。目前临床治疗手段有限，缺乏根治性方案，因此寻找安全有效的治疗药物及明确作用靶点成为亟待解决的临床难题。
高良姜素（GA）是从高良姜、蜂胶等天然产物中提取的黄酮类化合物，具有抗炎、抗氧化、抗衰老等多种生物活性，前期研究已证实其对氢醌诱导的白癜风小鼠模型具有治疗潜力，
1.高良姜素强效抑制巨噬细胞增殖
为明确高良姜素对白癜风免疫微环境的影响，研究团队首先分析了白癜风患者皮肤单细胞转录组数据，发现白癜风皮损中巨噬细胞和T细胞比例显著增加，黑色素细胞数量减少，提示免疫细胞浸润是疾病的重要特征。体外实验采用CCK-8法和EdU染色检测发现，高良姜素在2.5-10μM浓度范围内可显著抑制RAW264.7巨噬细胞增殖，且呈浓度依赖性，而对Jurkat T细胞的活力和凋亡无明显影响。流式细胞术结果证实，高良姜素处理后巨噬细胞凋亡比例无显著变化，表明其主要通过抑制巨噬细胞增殖而非诱导凋亡发挥作用。
这些结果表明，高良姜素具有选择性抑制巨噬细胞增殖的特性，为其调节白癜风免疫紊乱提供了细胞学基础。
2.高良姜素通过促进B16F10细胞增殖增加黑色素含量和酪氨酸酶活性
黑色素细胞丢失是白癜风的核心病理改变，研究团队进一步探讨了高良姜素对黑色素细胞的影响。CCK-8法检测显示，2.5-20μM浓度的高良姜素可促进B16F10黑色素瘤细胞增殖，EdU染色进一步证实其能浓度依赖性增加细胞DNA复制能力。在过氧化氢（H₂O₂）诱导的氧化应激模型中，高良姜素可显著提高B16F10细胞存活率，增加EdU阳性细胞数量，同时提升酪氨酸酶活性和黑色素含量，且呈剂量依赖性。此外，高良姜素还能减少H₂O₂诱导的线粒体活性氧（ROS）积累，稳定线粒体膜电位，恢复线粒体形态，减少钙内流，从而减轻氧化应激对黑色素细胞的损伤。
这些结果表明，高良姜素在抑制巨噬细胞增殖的同时，可促进黑色素细胞增殖并增强其功能， counteracting氧化应激损伤，为白癜风皮损复色提供了细胞学基础。
3.高良姜素改善过氧化氢诱导的白癜风小鼠皮肤状况
为验证高良姜素的体内治疗效果，研究团队构建了H₂O₂诱导的白癜风小鼠模型，从建模第26天开始每日外用高良姜素乳膏，持续30天。结果显示，模型组小鼠出现严重的白癜风样皮损，H&E染色显示皮肤色素脱失、皮损加重及炎症浸润，而高良姜素处理可显著改善这些组织学病变。免疫组化和Masson-Fontana染色证实，高良姜素能增加毛囊中黑色素含量，恢复皮肤黑色素水平。多重免疫组化染色显示，高良姜素可显著减少皮损中CD68⁺和F4/80⁺巨噬细胞浸润，降低血清中IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子及CXCL10、CXCL16等趋化因子水平，同时减少CD8⁺T细胞浸润。
这些结果表明，高良姜素在体内可通过抑制炎症细胞浸润和炎症因子释放，改善白癜风小鼠皮肤状况，促进色素恢复。
4.高良姜素改善咪喹莫特诱导的小鼠皮肤状况
为进一步验证高良姜素的抗炎作用，研究团队采用咪喹莫特诱导的皮肤炎症小鼠模型，每日外用高良姜素治疗。结果显示，咪喹莫特处理组小鼠出现明显的皮肤红斑、表皮增厚和脾肿大，而高良姜素可显著减轻红斑症状，降低皮肤厚度和脾脏指数，且对小鼠体重无明显影响。免疫荧光染色显示，高良姜素能减少皮损中CD68⁺和F4/80⁺巨噬细胞浸润，RT-qPCR结果证实其可下调皮肤中Il-36γ、Tnf-α、Il-1β等炎症因子及Cxcl1、Cxcl10等趋化因子的mRNA表达水平（图5h-i）。此外，高良姜素还能调节巨噬细胞极化，降低M1型巨噬细胞相关基因（Cd40、Il-6等）表达，上调M2型巨噬细胞相关基因（Arg1、Mgl1等）表达，同时减少脾脏中CD8⁺T细胞比例。
这些结果表明，高良姜素可有效改善炎症介导的皮肤损伤，调节免疫细胞平衡，进一步支持其在白癜风治疗中的潜在应用价值。  
5.高良姜素直接结合膜联蛋白A2并促进其降解
为阐明高良姜素的分子作用机制，研究团队通过免疫沉淀-质谱分析、pull-down实验等技术筛选其潜在作用靶点，发现高良姜素可与ANXA2特异性结合，而不与ANXA1、ANXA3等其他膜联蛋白家族成员相互作用。表面等离子体共振（SPR）实验测得二者的解离常数（KD）为6.74×10⁻⁶M，证实存在直接结合。分子对接模拟显示，高良姜素可能结合于ANXA2的Ser-207、His-209和Asp-441位点，突变实验进一步证实这些位点是结合的关键。Cycloheximide追踪实验表明，高良姜素不影响ANXA2的mRNA水平，但可促进其蛋白降解。体内实验证实，H₂O₂和咪喹莫特诱导的模型小鼠皮肤中ANXA2水平升高，而高良姜素处理可显著降低其表达。
这些结果表明，高良姜素通过直接结合ANXA2并促进其降解发挥作用。
6. 膜联蛋白A2敲除消除了高良姜素在小鼠中的保护作用
为验证ANXA2的关键作用，研究团队利用ANXA2敲除（KO）小鼠构建咪喹莫特诱导的皮肤炎症模型。结果显示，高良姜素可显著改善野生型（WT）小鼠的皮肤红斑、表皮增厚和脾肿大，减少炎症细胞浸润，而在ANXA2 KO小鼠中，高良姜素的这些保护作用完全消失。流式细胞术分析显示，高良姜素可降低WT小鼠脾脏中CD3⁺/CD45⁺细胞比例，增加CD8⁺/CD3⁺细胞比例，而在ANXA2 KO小鼠中无明显效果。
这些结果证实，高良姜素的抗炎和皮肤保护作用依赖于ANXA2的存在，ANXA2是其发挥治疗作用的关键靶点。
7.髓系细胞特异性敲除膜联蛋白A2消除了高良姜素在小鼠中的保护作用
为进一步明确巨噬细胞中ANXA2的作用，研究团队通过腺相关病毒（AAV）介导的基因沉默，构建了髓系细胞特异性ANXA2敲除小鼠模型，结合H₂O₂诱导的白癜风模型。结果显示，高良姜素可显著改善对照组（AAV-shCtrl）小鼠的皮肤皮损和色素脱失，减少炎症细胞浸润，而在髓系细胞特异性ANXA2敲除（AAV-shAnxa2）小鼠中，高良姜素的这些治疗效果显著减弱。免疫荧光染色显示，高良姜素可减少对照组小鼠皮肤中F4/80⁺和CD11b⁺巨噬细胞浸润，增加CD206⁺M2型巨噬细胞比例，而在ANXA2敲除小鼠中这些调节作用不明显。流式细胞术分析进一步证实，高良姜素对T细胞亚群的调节作用在ANXA2敲除后消失。
这些结果表明，高良姜素的抗白癜风作用主要依赖于巨噬细胞中的ANXA2，特异性敲除髓系细胞中的ANXA2可阻断其治疗效果。  
小结
本研究系统阐明了高良姜素治疗白癜风的分子机制，证实其通过“抑制巨噬细胞增殖+促进黑色素细胞功能”的双重作用发挥疗效，核心机制是直接结合巨噬细胞中的ANXA2并促进其降解，进而抑制巨噬细胞增殖、活化和极化，减少炎症因子和趋化因子释放，减轻免疫细胞浸润，同时保护黑色素细胞免受氧化应激损伤，促进色素恢复。体内外实验均证实，ANXA2是高良姜素发挥治疗作用的关键靶点，敲除ANXA2可完全阻断其保护效果。
该研究不仅为高良姜素的临床应用提供了坚实的科学依据，也首次揭示了ANXA2作为白癜风治疗靶点的潜在价值，为白癜风的精准治疗开辟了新路径。